| 中文名称 | MCF-10A 人乳腺上皮细胞 |
| 英文名称 | Human Normal Mammary Epithelial Cells ,MCF10A |
| 细胞特性 | 1） 来源：人 乳腺/乳房；疾病：纤维囊肿病
2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长
3） 含量：>1x10^6 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途：仅供科研使用 |
| 培养体系 | 准备MEGM kit培养基 （Lonza/Clonetics,CC-3150）备注：培养基包含（A+B）
A : MEBM基础培养液 5管
B: 细胞生长添加剂 5管
1) CC-4009G BPE 2.0ml
2) CC-4017G hEGF 0.5ml
3) CC-4021G INSULIN 0.5ml
4) CC-4031G HYDROCORTISONE 0.5ml
5) CC-4081G GA-1000 0.5ml
C: 霍乱毒素（cholera toxin） (100ng/ml) 500 ul
D: P/S青霉素-链霉素 5 ml
ATCC上MCF-10A细胞推荐上面的培养条件和试剂来培养该细胞，因市场长期断货，本公司用其它培养体系进行培养传代验证后已经稳定下来配方，采用的是跟ATCC上类似的无血清培养基来进行替代培养。
产品主要成分如下
基础培养基 500mL
对应的细胞培养添加剂 5mL
霍乱毒素（cholera toxin） (100ng/ml) 500 ul
ITS（胰岛素+转铁蛋白+硒） 5 mL
P/S青霉素-链霉素 5mL
推荐：MCF-10A细胞专用培养基（TS-CC0367A） |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 培养参考: 细胞消化时间25-30min (0.25%胰酶) 。传代周期3-4天.
注意事项:
（1）该细胞较难消化，注意延长消化时间，消化到细胞收缩变圆，轻拍培养瓶侧边，细胞可以滑落方可终止消化
（2）该细胞贴壁较慢，传代后贴壁24~48小时后再进行后续操作。
（3） 建议使用Corning的cellbind细胞培养瓶(货号: 3289) 进行细胞培养
（4）使用0.25%胰酶消化后，加入几倍体积的完全培养液稀释后（或者加入加入3-4ml用RPMI1640或者DMEM等基础培养基配置的含10%FBS）的培养基来终止消化后，1000rpm/5min,去除胰酶后加入完全培养液进行传代。 |
| 传代 | 1:2传代 |
| 冻存方法 | 冻存液：92%完全培养基，8%DMSO，现用现配。 |
| 备注 | 备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 |
| 注意事项 | 1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2.收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。 |